核磁（NMR）pulcon法含量测定的应用

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电子参考法即基于脉宽的浓度测定，该方法可以将两个不同的谱图的绝对浓度关联起来。
用PULCON进行浓度测量的理论基础是样品的90°脉宽与NMR信号强度成反比。



分别配置已知浓度的标准品和已知浓度的样品进样测试
根据标准品的浓度可直接计算出样品的真实浓度



优点

不破坏样品：无需添加内部参考化合物且无需稀释样品，既可避免相互作用又可完整保存待测样品。
检测高效快捷：该方法适用于不同的溶剂条件、添加剂和温度范围，只需为准备一个标准品参考光谱。


缺点

浓度测量的准确性高度依赖于NMR光谱中信号积分的精确性，导致信号重叠或基线不平的情况下准确度变差。
该方法依赖硬件条件与样品浓度，重现性较差。
需要待测物的标准品：对于复杂或稀有样品，标准品难以获取。


适用场景


蛋白质溶液‌：包括各种纯化的蛋白质样品，无论是在缓冲液中还是在复杂的生物液体环境中。
‌生物大分子溶液‌：如核酸、多糖和其他生物活性分子，能够在NMR光谱中产生可分辨的信号。